材料和方法
BSA822電子天平(百分之一), 賽多利斯(上海)貿(mào)易有限公司;GR85DA 高壓滅菌鍋,致微(廈門)儀器有限公 司;DHP-9272電熱恒溫培養(yǎng)箱,上海齊欣科學(xué)有限公司;HR40-IIA2生物安全柜,青島海爾 特種電器有限公司;HCB-1300V超凈工作臺, 青島海爾特種電器有限公司;移液器,普蘭德 (上海)貿(mào)易有限公司;FE28-Standard酸度計(jì) (pH計(jì)),瑞士梅特勒-托利多。無菌操作稱取25 g樣品,置于盛 有225 ml BPW的無菌均質(zhì)袋中,用拍擊式均質(zhì) 器拍打1~2 min。用1 mol/ml無菌NaOH或HCL調(diào) pH至6.8±0.2,于36 ℃±1 ℃培養(yǎng)8~18 h。輕輕搖動培養(yǎng)過的樣品混合物,移 取1 ml,轉(zhuǎn)種于10 ml TTB內(nèi),另取1 ml,轉(zhuǎn)種 于10 ml SC內(nèi),同時(shí)于陽性對照間接種沙門氏菌 標(biāo)準(zhǔn)菌株陽性對照,TTB增菌液于42 ℃±1℃ 培養(yǎng)18~24 h,增菌液于36 ℃±1 ℃培養(yǎng) 18~24 h。
結(jié)果
近年來,隨著人畜感染沙門氏菌病例增 多,食品中沙門氏菌的檢測已經(jīng)成為不可或缺 的一環(huán)。而傳統(tǒng)國標(biāo)的沙門氏菌檢測方法雖然 可以對沙門氏菌進(jìn)行檢測,但也有檢測時(shí)間過 長、檢測步驟繁瑣等缺點(diǎn)。隨著生物技術(shù)的發(fā) 展,沙門氏菌的檢測技術(shù)也在不斷地發(fā)展進(jìn) 步,許多快速檢測方法開始應(yīng)用于沙門氏菌的 檢測,且48 h內(nèi)就可檢出沙門氏菌。直到現(xiàn) 在,已經(jīng)在應(yīng)用中的方法有免疫學(xué)方法(包括 酶聯(lián)免疫吸附法、斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫吸附、斑點(diǎn)免 疫金滲濾法、免疫磁性分離技術(shù)、免疫熒光標(biāo) 記、自動酶標(biāo)免疫檢測儀、葡萄球菌A蛋白協(xié) 凝試驗(yàn)法等)、分子生物學(xué)方法(包括聚合酶 鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)、核酸探針、擴(kuò)增片段長 度多態(tài)性技術(shù)、基因芯片技術(shù)、環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò) 增方法、熒光定量PCR、噬菌體裂解試驗(yàn)、原 位熒光 LAMP 技術(shù)等)。